赵孟良^{1, 3 *} , 任钢^{2 *} , 李屹^{1, 3} , 任鹏鸿^{1, 3} , 钟启文^{1, 3 **}

1青海大学农林科学院, 西宁, 810016;
2青海省海西州农科所, 海西, 817000;
3青海省蔬菜遗传与生理重点实验室, 西宁, 810016
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16 卷, 第 23 篇   
收稿日期: 2017年04月27日    接受日期: 2017年05月08日    发表日期: 2017年06月13日

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        为建立枸杞ISSR-PCR反应体系，通过单因子优化试验和L₁₆ (4⁵)正交试验设计对相关参数进行了优化，其最优体系为20 μL含Mg²⁺ 2.0 mmol/L、dNTPs 0.25 mmol/L、引物0.6 μmol/L、TaqDNA聚合酶0.75 U、模板DNA60 ng。对优化体系进行了稳定性检测，并从100条ISSR引物中筛选出12条，对7份枸杞资源进行了PCR扩增。实验结果表明，12条ISSR引物对7 份枸杞种质资源共扩增出132个条带，其中多态性条带共123条，比率为93.2%；7份枸杞资源遗传距离分布在2.57-8.39，其中长辣椒与黑枸杞遗传关系最远；平均有效等位基因数为1.7156，平均Nei's多样性指数为0.4039，平均Shannon’s指数为0.5888。ISSR标记可用于枸杞遗传多样性研究。

枸杞；ISSR-PCR；体系优化；引物筛选；遗传多样性